培养基是用人工方法按照微生物的生长需要，制成的一种营养物制品。其主要用途是对微生物进行分离培养、传代保存与鉴别以及研究微生物的生理生化特性；制造菌苗、疫苗或生物制品等。所以培养微生物的培养基必须符合微生物的生长繁殖要求，否则微生物在该培养基中是不生长的。常用的培养基有基础培养基、增菌培养基、选择培养基、鉴别培养基和厌氧培养基等。

（一）基础培养基的制备

1.牛肉水  成分：瘦牛肉 500g；常水 1000mL。方法：除去瘦牛肉的脂肪、腱膜，切成小块，用绞肉机绞碎。秤其重量，加倍量水，浸泡一夜（夏天防止腐败可省去）。煮沸1h，在加热煮沸中间，须多次搅拌。用白粗布滤去肉渣，并挤出内渣中的残存肉水。滤下的肉水再用滤纸滤过一次。计量体积，以常水补足到原来的量，分装于烧瓶内，置高压蒸气锅内以121℃灭菌20～30min后，放冷暗处保存。如用牛肉膏制备肉水时，可往1000mL蒸馏水中加3g牛肉膏，溶化后即可。用途：制造各种培养基的基础。

2.普通肉汤  成分：牛肉水1000mL；蛋白胨 10g；氯化钠 5g。方法：①取一定量牛肉水，加入蛋白胨和氯化钠后，放流通蒸气锅内加温溶解30min。②用 0.1mol/L和1mol/L的氢氧化钠、0.1mol/L和1mol/L的盐酸溶液修正pH至7.4～7.6（每1000mL加2N NaOH液约12～15mL）。③放流通蒸气锅内加热30min，使碱溶解，并析出沉淀物。④用滤纸过滤，滤过后的肉汤必须完全透明，分装于试管的1/3处。⑤置高压蒸气锅内，以121℃灭菌20～30min。用途：①用作细菌的液体培养。②检查细菌的发育状况，以及观察细菌形成沉淀物、菌膜、菌环等的情况。

3.普通琼脂  成分：牛肉水1000mL；蛋白胨 l0g；氯化钠 5g；琼脂 20～30g。方法：①取—定量牛肉水，加入蛋白胨和氯化钠后，放流通蒸气锅内加温30min，修正PH为7.4～7.6，再置流通蒸气锅内加热30min，用滤纸滤过。②加入一定量的琼脂，在室温以37℃时成为固体，便于生长成菌落和分离细菌纯种。琼脂呈酸性，故用其制造培养基时，需用碱液修正成弱碱性，置流通热气锅内加温溶解。    ③分装于试管内或三角瓶中，置高压蒸气锅内，以121℃灭菌20min。如作菌种传代、纯培养时，可放成斜面，如用其分离培养时，可做成平板。用途：①细菌的分离培养、纯培养、观察菌落的性状及保存菌种用。②制造特殊培养基的基础。

（二）常用特殊培养基的制备

1.血液琼脂  成分：脱纤血液（无菌）5～10mL；普通琼脂100mL。方法：取制备的普通琼脂，溶解后冷至50℃左右，按以上数量加入无菌的脱纤维血液（马血、羊血或家兔血均可），混合后做成斜面或平板。使用前须作无菌检验。用途：   ①某些病原菌（如马腺疫链球菌、巴氏杆菌等）的分离培养。②观察细菌的溶血现象，作鉴别用。③斜面常用于保存要求营养高的菌种。

2. SS琼脂  成份：基础培养基1000mL；乳糖10g；柠檬酸钠8.5g；硫代硫酸钠8.5g；10％柠檬酸铁溶液10mL ；1％中性红溶液2.5mL；0.1％煌绿溶液0.22mL。方法：加热溶化培养基，按比例加入上述染料以外之各成分，充分混合均匀，校正pH7．0，加入中性红和煌绿溶液，倾注平板。注意事项：①制好的培养基宜当日使用，或保存于冰箱内于48小时内使用。②煌绿溶液配好后应在10天以内使用。③可以购用SS琼脂的干燥培养基。用途：用于沙门氏菌、志贺氏菌的选择性分离培养。

3. 麦康凯琼脂  成份：蛋白胨17g；肘胨3g；猪胆盐（或牛、羊胆盐）5g ；氯化钠5g；琼脂17g ；乳糖10g ； 0.01％结晶紫水溶液10mL；0.5％中性红水溶液5mL；蒸馏水1000mL。方法：将蛋白胨、肘胨、胆盐和氯化钠溶解于400mL蒸馏水中，校正至pH7.2。将琼脂加入于600mL蒸馏水中，加热溶解。将两液合并，分装于烧瓶内，121℃高灭菌15分钟备用。临用时加热溶化琼脂，趁热加入乳糖。冷至50～55℃时，加入结晶紫和中性红水溶液，摇匀后倾注平板。结晶紫及中性红水溶液配好后须经高压灭菌。用途：临床用于分离肠细菌。此培养基可抑制革兰氏阳性菌，可区分乳糖发酵性和非发酵性菌。还可以区分耶尔森菌和巴斯德氏菌，巴斯德氏菌不能生长。

4. 伊红美蓝琼脂（EMB）  成份：蛋白胨10g ；乳糖10g；磷酸氢二钾2g；琼脂17g；2％伊红y溶液20mL；0．65％美蓝溶液10mL；蒸馏水1000mL。方法法：将蛋白胨、磷酸盐和琼脂溶解于蒸馏水中，校正pH7．1，分装于烧瓶内，121℃高压灭菌15分钟备用。临用时加入乳糖并加热溶化琼脂，冷却至50～55℃，加入伊红和美蓝溶液，摇匀，倾注平板。用途：用于革兰氏阴性肠道菌的分离和鉴别。大肠杆菌在 EMB 上发酵乳糖，形成黑色菌落，大部分有金属光泽。沙门氏菌形成无色菌落。金黄色葡萄球菌基本上不生长。