实验二 发情周期的检测

一、目的要求

掌握阴道涂片法鉴别母畜发情周期的方法。

二、实验材料

雌性性成熟小鼠50只、滴管10个、载玻片100张、生理盐水1000 mL、95%酒精1000 mL、苏木精染色液200 mL、1%盐酸乙醇溶液500 mL、伊红染色液200 ml、烧杯(1L，5个)，滴瓶（100ml, 5种×5组= 25个）,普通显微镜。

三、内容和步骤

（一）阴道涂片的制作与观察

1、加样：左手保定待检小鼠，右手用已消毒的滴管吸取少量已经37℃预热的生理盐水，将滴管头稍稍伸入小鼠阴道口，轻轻反复挤压滴管胶头3-5次以润洗小鼠的阴道。然后将滴管内生理盐水滴1滴于一张干净的载玻片之上；

2、抹片：用滴管头将液滴摊开、平铺于载玻片之上，然后置于室温通风干燥处，充分干燥，未见明显水迹即可；

3、固定：滴加适量95%酒精覆盖样品区域，固定5-8 min，等待酒精充分干燥；

4、苏木精染色：滴加适量苏木精染色液进行染色20-30s，之后立即进行分化；

5、分化：滴加适量1%盐酸乙醇溶液分化，5s之后立即进行伊红染色；

6、伊红染色：滴加适量伊红溶液染色1 min，随即自来水冲洗去除多余染色液；

7、观察：甩干多余水滴，普通光学显微镜下观察。

（二）结果判定

根据发情周期不同阶段的外阴部特征及阴道脱落上皮细胞特征作出判定。

四、实验报告

1、用红蓝铅笔简单图示实验结果，并注明发情时期；

2、生产中母猪产后久不发情主要有哪些处理措施？